专利名称 ---【 一种基于毛细管电泳的依诺肝素钠精细结构测定方法 】

基本信息
申请号
CN201280000857.2
申请日
20120120
公开(公告)号
CN102792158B
公开(公告)日
20121121
申请(专利权)人
杭州九源基因工程有限公司;中国科学院上海有机化学研究所
申请人地址
310018 浙江省杭州市杭州经济技术开发区8号大街23号
发明人
康经武;展学强; 专利类型 发明专利
摘要
本发明提供一种用于定量分析依诺肝素钠特征性寡糖结构的毛细管电泳方法。本方法用于定量测定经肝素酶I、II、III混合溶液完全降解依诺肝素钠后产生的二糖、三糖、四糖,以及具有依诺肝素特有的标志性结构的1,6成环寡糖的含量,从而定量测定出依诺肝素钠1,6成环率。本方法可以用于依诺肝素钠药物生产过程中的质量控制。
主权项
一种依诺肝素钠精细结构的检测方法,包括如下步骤:(1)用混合肝素酶将依诺肝素钠样品完全酶解;(2)通过毛细管电泳对依诺肝素钠完全酶解产物中的二糖、三糖、四糖以及具有1,6‑成环结构的寡糖进行分离;所述的毛细管电泳分离的条件为石英毛细管总长范围为50~100cm,柱内径范围为25~75μm;电泳缓冲溶液选自NaH2PO4‑H3PO4,Tris‑H3PO4或LiH2PO4‑H3PO4,浓度范围为150~300mM,pH范围为1.5~4.0;电泳时分离电压为‑15~‑30kV;采用压力进样,压力范围为1~100mbar,进样时间范围为1~60s;在最后一个硫酸化二糖ΔIIA出峰之后向进样端施加一定的气压将ΔIVA推向检测窗口进行检测;电泳时毛细管柱温范围为10~40℃,检测波长为紫外230‑235nm;(3)根据完全酶解后所得到的寡糖的电荷质量比与其电泳淌度之间的线性关系对分离峰所对应的酶解产物进行鉴定;(4)根据色谱峰峰面积对酶解产物含量进行定量测定。

 

IPC信息
IPC主分类号
G01N27/447

 

法律状态信息
法律状态公告日
20121121
法律状态
公开 法律状态信息
CN201280000857 20121121 公开 公开
法律状态公告日
20130116
法律状态
实质审查的生效 法律状态信息
CN201280000857 20130116 实质审查的生效 实质审查的生效IPC(主分类):G01N 27/447申请日:20120120
法律状态公告日
20130710
法律状态
授权 法律状态信息
CN201280000857 20130710 授权 授权

 

代理信息
代理机构名称
浙江杭州金通专利事务所有限公司 33100
代理人姓名
徐关寿


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