专利名称 ---【 一种免疫缺陷小鼠模型的建立方法 】

基本信息
申请号
CN201310229629.9
申请日
2013.06.09
公开(公告)号
CN103409468A
公开(公告)日
2013.11.27
申请(专利权)人
中国科学院广州生物医药与健康研究院
申请人地址
510530 广东省广州市萝岗区科学城开源大道190号
发明人
李鹏;刘志新;蒋志武;王素娜;尹爱兰;钟梅;贾蓓 专利类型 发明专利
摘要
本发明公开的免疫缺陷小鼠模型的建立方法,包括如下步骤:(1)构建使小鼠细胞中免疫相关基因功能丧失的DNA;(2)步骤(1)构建出的DNA纯化后经逆转录酶经体外转录为mRNA;(3)mRNA纯化并冻存于RNAase?free的超纯水中;(4)在SPF级别饲养条件下,饲养受孕雌鼠和假孕雌鼠;(5)从步骤(4)的受孕雌鼠腹腔中获取输卵管,收集受精卵;(6)用显微注射法将步骤(3)获得的mRNA注射进步骤(5)得到的受精卵的原核内;(7)将步骤(6)获得的受精卵移植入步骤(4)获得的假孕雌鼠体内,假孕雌鼠开始培育第二代;(8)建立稳定的缺陷小鼠品系。本发明的优点,能够得到完全对异体移植无免疫排斥作用的小鼠模型用于试验。
主权项
一种免疫缺陷小鼠模型的建立方法,其特征在于,该方法包括如下步骤:(1)利用TEALN基因敲除术,构建使小鼠细胞中免疫相关基因功能丧失的DNA;(2)将步骤(1)构建出的DNA纯化,纯化后使用SP6逆转录酶经体外转录为mRNA;(3)将步骤(2)得到的mRNA纯化,并冻存于RNAase?free的超纯水中,以备显微注射之用;(4)在SPF级别饲养条件下,饲养受孕雌鼠和假孕雌鼠;(5)从步骤(4)的受孕雌鼠腹腔中获取输卵管,用质量浓度为0.9%的生理盐水清洗后,放在显微镜下观察,挑取并收集受精卵;(6)用显微注射法将步骤(3)获得的mRNA注射进步骤(5)得到的受精卵的原核内,受精卵将mRNA翻译成蛋白,蛋白结合到免疫相关基因,破坏免疫相关基因序列,从而使免疫相关基因的功能丧失。(7)将步骤(6)获得的受精卵移植入步骤(4)获得的假孕雌鼠体内,假孕雌鼠开始培育第二代;(8)将步骤(7)获得的免疫缺陷小鼠自交,扩大种群数量,建立稳定的缺陷小鼠品系。

 

IPC信息
IPC主分类号
C12N15/89(2006.01)I
IPC分类号
C12N15/89(2006.01)I;A01K67/027(2006.01)I

 

法律状态信息
法律状态公告日
2015.10.28
法律状态
著录事项变更 法律状态信息
著录事项变更 IPC(主分类):C12N 15/89 变更事项:发明人 变更前:李鹏 刘志新 蒋志武 王素娜 尹爱兰 钟梅 贾蓓 变更后:李鹏 刘志新 蒋治武 王素娜 尹爱兰 钟梅 贾蓓
法律状态公告日
2015.08.12
法律状态
授权 法律状态信息
授权
法律状态公告日
2013.12.18
法律状态
实质审查的生效 法律状态信息
实质审查的生效 IPC(主分类):C12N 15/89 申请日:20130609
法律状态公告日
2013.11.27
法律状态
公开 法律状态信息
公开

 

代理信息
代理机构名称
北京东正专利代理事务所(普通合伙) 11312
代理人姓名
蔡仲德
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