| 基本信息 | |||
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申请号 |
CN201310229629.9 | 申请日 |
2013.06.09 |
公开（公告）号
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CN103409468A | 公开（公告）日
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2013.11.27 |
申请（专利权）人
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中国科学院广州生物医药与健康研究院
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申请人地址
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510530 广东省广州市萝岗区科学城开源大道190号 | ||
发明人
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李鹏;刘志新;蒋志武;王素娜;尹爱兰;钟梅;贾蓓 | 专利类型 |
发明专利 |
摘要
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本发明公开的免疫缺陷小鼠模型的建立方法，包括如下步骤：(1)构建使小鼠细胞中免疫相关基因功能丧失的DNA；(2)步骤(1)构建出的DNA纯化后经逆转录酶经体外转录为mRNA；(3)mRNA纯化并冻存于RNAase?free的超纯水中；(4)在SPF级别饲养条件下，饲养受孕雌鼠和假孕雌鼠；(5)从步骤(4)的受孕雌鼠腹腔中获取输卵管，收集受精卵；(6)用显微注射法将步骤(3)获得的mRNA注射进步骤(5)得到的受精卵的原核内；(7)将步骤(6)获得的受精卵移植入步骤(4)获得的假孕雌鼠体内，假孕雌鼠开始培育第二代；(8)建立稳定的缺陷小鼠品系。本发明的优点，能够得到完全对异体移植无免疫排斥作用的小鼠模型用于试验。 |
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主权项
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一种免疫缺陷小鼠模型的建立方法，其特征在于，该方法包括如下步骤：(1)利用TEALN基因敲除术，构建使小鼠细胞中免疫相关基因功能丧失的DNA；(2)将步骤(1)构建出的DNA纯化，纯化后使用SP6逆转录酶经体外转录为mRNA；(3)将步骤(2)得到的mRNA纯化，并冻存于RNAase?free的超纯水中，以备显微注射之用；(4)在SPF级别饲养条件下，饲养受孕雌鼠和假孕雌鼠；(5)从步骤(4)的受孕雌鼠腹腔中获取输卵管，用质量浓度为0.9％的生理盐水清洗后，放在显微镜下观察，挑取并收集受精卵；(6)用显微注射法将步骤(3)获得的mRNA注射进步骤(5)得到的受精卵的原核内，受精卵将mRNA翻译成蛋白，蛋白结合到免疫相关基因，破坏免疫相关基因序列，从而使免疫相关基因的功能丧失。(7)将步骤(6)获得的受精卵移植入步骤(4)获得的假孕雌鼠体内，假孕雌鼠开始培育第二代；(8)将步骤(7)获得的免疫缺陷小鼠自交，扩大种群数量，建立稳定的缺陷小鼠品系。 |
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IPC信息 |
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IPC主分类号
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C12N15/89(2006.01)I | ||
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IPC分类号
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C12N15/89(2006.01)I;A01K67/027(2006.01)I | ||
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法律状态信息 |
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法律状态公告日
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2015.10.28 | 法律状态
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著录事项变更 | 法律状态信息 | 著录事项变更 IPC(主分类):C12N 15/89 变更事项:发明人 变更前:李鹏 刘志新 蒋志武 王素娜 尹爱兰 钟梅 贾蓓 变更后:李鹏 刘志新 蒋治武 王素娜 尹爱兰 钟梅 贾蓓 |
法律状态公告日
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2015.08.12 | 法律状态
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授权 | 法律状态信息 | 授权 |
法律状态公告日
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2013.12.18 | 法律状态
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实质审查的生效 | 法律状态信息 | 实质审查的生效 IPC(主分类):C12N 15/89 申请日:20130609 |
法律状态公告日
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2013.11.27 | 法律状态
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公开 | 法律状态信息 | 公开 |
代理信息 |
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代理机构名称
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北京东正专利代理事务所(普通合伙) 11312 | 代理人姓名
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蔡仲德 |
γ型干扰素、CD4^＋CD25^＋调节性T细胞与自身免疫病
作者:马海霞 刘光伟 赵勇 
