专利名称 ---【 一种复合干扰素的纯化方法 】

基本信息
申请号
CN200310121343.5
申请日
2003.12.12
公开(公告)号
CN1626551
公开(公告)日
2005.06.15
申请(专利权)人
中国科学院过程工程研究所
申请人地址
100080北京市海淀区中关村北二条1号
发明人
刘永东;李京京;王芳薇;苏志国; 专利类型 发明专利
摘要
本发明提供一种复合干扰素的纯化方法,包括如 下步骤:将经常规方法发酵并收集的包涵体变性得到的复合干 扰素,边搅拌边加入缓冲液D,然后在可以透过分子量50000 以下的透析袋中,于缓冲液E中透析,进行复合干扰素蛋白质 的复性;分出上清液,在装有强阳离子交换介质的层析柱上用 缓冲液F和缓冲液G梯度洗脱,得到纯化的复合干扰素。本方 法不仅能完全去除分子量在3~4万的杂蛋白,而且能将复性 中间体与完全复性的蛋白基本分开,从而所得复合干扰素纯度 高,产品结构也更均一。
主权项
1、一种复合干扰素的纯化方法,包括如下步骤: 1)将经常规方法发酵并收集的包涵体变性得到的复合干扰素,边搅拌边加入缓冲液 D,所加入的缓冲液D与复合干扰素的体积比为40~100∶1,然后将混合液静置过夜; 2)将步骤1)经静置的混合液装入可以透过分子量50000以下的透析袋中,于缓冲 液E中透析12~24小时,进行复合干扰素蛋白质的复性,缓冲液E与混合液的体积 比为5~20∶1; 3)从步骤2)经透析的混合液中分出上清液,得到复性的复合干扰素溶液; 4)用缓冲液F平衡装有强阳离子交换介质的层析柱,介质装填高度为5~25cm,将 步骤3)的已复性的复合干扰素溶液调pH至3.5~6.0后上柱,上样量不超过15mg/ml, 然后用2倍柱体积的缓冲液F淋洗,再用5~10倍柱体积的含缓冲液G和缓冲液F 的混合液进行梯度洗脱,淋洗时的流速为50~200cm/min,收集第二个蛋白洗脱峰时 的洗脱液,最后将此洗脱液浓缩,得到纯化的复合干扰素; 所述步骤1)的缓冲液D为100mM?Tris、0.5M精氨酸和0.2mM乙二胺四乙酸二 钠,用HCl调pH至8.3; 所述步骤2)的缓冲液E为25mM?Tris-HCl,pH8.3; 所述步骤4)的缓冲液F为pH3.5~6.0的5~50mM磷酸氢二钠-磷酸二氢钠, 柠檬酸-柠檬酸钠,磷酸氢二钠-柠檬酸,柠檬酸-氢氧化钠-盐酸,乙酸钠-乙酸 或磷酸二氢钾-氢氧化钠; 所述步骤4)的缓冲液G为1M?NaCl溶于所述步骤4)的缓冲液F中; 所述步骤4)用于梯度淋洗的混合缓冲液中缓冲液G占混合缓冲液总体积的10~ 60%。

 

IPC信息
IPC主分类号
C07K14/555
IPC分类号
C07K14/555;C07K1/14

 

法律状态信息
法律状态公告日
2015.02.04
法律状态
专利权的终止 法律状态信息
未缴年费专利权终止 IPC(主分类):C07K 14/555 申请日:20031212 授权公告日:20060614 终止日期:20131212
法律状态公告日
2006.06.14
法律状态
授权 法律状态信息
授权
法律状态公告日
2005.08.17
法律状态
实质审查的生效 法律状态信息
实质审查的生效
法律状态公告日
2005.06.15
法律状态
公开 法律状态信息
公开

 

代理信息
代理机构名称
北京泛华伟业知识产权代理有限公司
代理人姓名
王凤华

 

被引专利信息
引用阶段 被引时间 专利号 申请人 公开时间

 

被引非专利信息
引用阶段 被引时间 被引文档类型 被引文档信息
相似专利

[发明专利] 可消除复合源交叉干扰的气体排放通量检测系统及其方法
发明人:张玉钧; 唐七星; 何莹; 尤坤; 范博强; 余冬琪; 李梦琪; 谢皓; 李潇毅; 刘建国; 刘文清 申请日:2018-12-12

[发明专利] 一种双杂原子掺杂的石墨烯/多孔碳复合物的制备和质谱分析应用
发明人:王俊中; 赵慧芳 申请日:2018-09-30

[发明专利] 主被动复合激光全息雷达
发明人:卢智勇;孙建锋;周煜;栾竹;王利娟;刘立人 申请日:2018-09-07

[发明专利] 一种高热流密度散热用复合射流冷却热沉
发明人:张添;吴亦农;谢荣建;董德平;张畅 申请日:2018-08-20

[发明专利] 一种石墨烯复合锂电导电浆料的制备方法
发明人:张亦弛;张永毅;汪细平;周世武;靖岚林 申请日:2018-06-05

相似科技成果

油田老化油处理技术与设备
主题词:[老化油;处理技术;设备] 单位名称:中国科学院沈阳应用生态研究所

红外准直光学系统及背景干扰模拟系统
主题词:[红外准直;光学设计] 单位名称:中国科学院长春光学精密机械与物理研究所

撬装式老化油处理设备
主题词:[老化油;处理;设备] 单位名称:中国科学院沈阳应用生态研究所

臭气生物处理技术与设备
主题词:[臭味气体;生物处理] 单位名称:中国科学院生态环境研究中心

环境内分泌干扰物的筛选与控制技术
主题词:[环境内分泌干扰物;筛选;控制技术] 单位名称:中国科学院生态环境研究中心

     分享到:0


| 联系我们 | 网站地图 | 版权声明 |

版权:中国科学院 主办:中国科学院科技促进发展局 承办:中国科学院成都文献情报中心 蜀ICP备05003827号-12

建议使用1024×768 分辨率 IE6.0以上版本浏览器