专利名称 ---【 三步法快速检测石斑鱼β诺达病毒的试剂盒及其操作方法 】

基本信息
申请号
CN201610277466.5
申请日
20160428
公开(公告)号
CN105695639B
公开(公告)日
20160622
申请(专利权)人
中国科学院南海海洋研究所
申请人地址
510301 广东省广州市新港西路164号
发明人
黄文;任春华;赵哲;胡超群;王艳红;陈廷;江晓;罗鹏 专利类型 发明专利
摘要
本发明公开了三步法快速检测石斑鱼β诺达病毒的试剂盒及其操作方法。本发明试剂盒包括:PBS预处理液、RNA快速提取液和检测液。本发明采用了快速提取RNA的方法,加上预混检测液、试剂一次性使用等设计,通过简化的三步操作即可完成病毒检测,检测过程不易被污染,可操作性强。本发明设计的试剂盒检测结果可视化,适用于无专业知识的基层工作人员,可用于防控石斑鱼诺达病毒的流行,应用前景广泛,适合商业化生产。
主权项
1.一种三步法快速检测石斑鱼β诺达病毒的试剂盒,其特征在于,所述的试剂盒包括:PBS预处理液、RNA快速提取液和检测液;所述的PBS预处理液是pH7.2±0.2的PBS溶液;所述的RNA快速提取液是Epicentre Biotechnologies公司QuickExtractTM RNA Extraction Solution型号的试剂;所述的检测液为环介导等温扩增反应液,其每20μl体系中含有:8-10U/μl Bst 2.0聚合酶1μl,1-2U/μl AMV逆转录酶1μl,15-20U/μl RNase抑制剂1μl,1.0-2.0mM dNTPs 3.5μl,10×Amplification Buffer 2.5μl,6-8mM MgSO4 1.5μl,1M甜菜碱5μl,10×SYTO-9染料0.5μl,0.2μM上游外引物F3 1μl,0.2μM下游外引物B3 1μl,1.6μM上游内引物FIP 1μl,1.6μM下游内引物BIP 1μl;其中,10×Amplification Buffer含有200mM Tris-HCl、100mM(NH4)2SO4、500mM KCl、20mM MgSO4和1%Tween 20,PH 8.8;上游外引物F3为:5’-GGTGCAGTCGTTGCCAAAT-3’,下游外引物B3为:5’-CGACATAGCACCGACACG-3’,上游内引物FIP为:5’-TCCTTTCCCGACGAGGTCCAGGTGGGAAAGCAGTACAGTCC-3’,下游内引物BIP为:5’-AGCGTCTCACGTCACCTGGTACCACATCGGTGTTGTTGC-3’。

 

IPC信息
IPC主分类号
C12Q1/70

 

法律状态信息
法律状态公告日
20160622
法律状态
公开 法律状态信息
CN201610277466 20160622 公开 公开
法律状态公告日
20160720
法律状态
实质审查的生效 法律状态信息
CN201610277466 20160720 实质审查的生效 实质审查的生效IPC(主分类):C12Q 1/70申请日:20160428
法律状态公告日
20190611
法律状态
授权 法律状态信息
CN201610277466 20190611 授权 授权

 

代理信息
代理机构名称
广州科粤专利商标代理有限公司 44001
代理人姓名
刘明星


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